TrypRE select(1×)是畢赤酵母(Pichia Pastoris)基因工程菌株,經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)、分離純化、配制而得到的重組熱穩(wěn)定胰蛋白酶消化液。TrypRE select是一種非動物源性重組酶,可用于解離多種貼壁哺乳動物細胞,包括CHO、HEK 293、A529、原代人角質(zhì)化細胞和胚胎干細胞。本品所用的重組酶是來源于尖孢鐮孢(Fusarium oxysporum)的胰蛋白酶樣蛋白酶,是一種絲氨酸蛋白酶,能選擇地水解蛋白質(zhì)中由賴氨酸或精氨酸的羧基末端所構(gòu)成的肽鏈,具有重組豬胰蛋白酶、重組牛胰蛋白酶相同的酶學(xué)性質(zhì)。
TrypRE select(1×)在細胞實驗中已被證明可以有效地解離含血清和不含血清培養(yǎng)的貼壁細胞,具有與重組豬胰蛋白酶相似的消化特性。與重組豬胰蛋白酶等不同,TrypRE select(1×)不易自切,可在2-8℃、室溫下穩(wěn)定存放,使用方便。
產(chǎn)品優(yōu)勢:
與普通胰蛋白酶和其他解離試劑相比,TrypRE select(1×)具有以下特點:
無動物源性:無動物病毒、無致病物質(zhì)、無外源因子污染,安全性高。
在室溫下穩(wěn)定:使用方便。
對細胞作用溫和:細胞毒性小,可保持細胞健康。
合規(guī)性:生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規(guī)要求,符合 GMP 指導(dǎo)原則。
質(zhì)量文件完整:按客戶需求,可提供相關(guān)法規(guī)支持文件
產(chǎn)品中文名同義詞:重組胰蛋白酶消化液
注意事項與免責(zé)聲明
本品開瓶后應(yīng)盡快使用,保存過程中應(yīng)防止微生物污染。
本品僅供科研生產(chǎn)使用,不得用于人體。
運輸和儲存穩(wěn)定性
運輸穩(wěn)定性:冰袋保溫運輸,活性穩(wěn)定。
儲存穩(wěn)定性:儲存穩(wěn)定性:在2-8℃、密封、避光條件下可保存24個月,也可在-15℃及以下、密封、避光條件下保存24個月。在室溫、密封、避光條件下可保存1個月。
推薦使用方法
1)使用前將TrypRE select(1×)和完全生長培養(yǎng)基預(yù)熱至37℃。最大限度地減少停留時間。
2)吸出并丟棄用過的培養(yǎng)基。
3)用5ml不含鈣和鎂的DPBS緩沖液清洗細胞。吸出并丟棄。
4)加入適量體積TrypRE select(1×)到培養(yǎng)瓶(如5ml到75ml培養(yǎng)瓶),確保TrypRE select(1×)完全覆蓋細胞。
5)在37℃下孵育,直至細胞脫落。使用倒置顯微鏡觀察細胞,以確保細胞從培養(yǎng)瓶表面完全脫落。如有必要,輕輕敲擊培養(yǎng)瓶以去除細胞。
6)加入5-10ml預(yù)熱的完全培養(yǎng)基到培養(yǎng)瓶。傾斜培養(yǎng)瓶直到徹底沖洗培養(yǎng)瓶。將細胞懸液轉(zhuǎn)移至15ml錐形管中。
7)100×g離心5-10min。
8)丟棄上清液,并用2-5ml預(yù)熱的完全培養(yǎng)基重懸細胞沉淀。
9)使用自動細胞計數(shù)器確定活細胞密度和存活率。
10)根據(jù)您的細胞類型,根據(jù)正常方案接種、孵育和繼代培養(yǎng)。
持續(xù)更新中......
畢赤酵母
單一主條帶(SDS-PAGE)
≥200 USP units/ml
280-300mOsm/kg
7.0-7.4
≤1.0EU/ml
陰性
* 實際核心參數(shù)以產(chǎn)品每批次COA為準(zhǔn);