腸激酶(Enterokinase, EK)是一種高度專一性識別 Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白酶,在 Lys 的 C 端水解多肽。具有高度專一性,水解效率高的特點??稍谳^寬的 pH 范圍(4.5~9.5)和較寬溫度范圍內有效切割融合蛋白??沙ノ挥诘鞍踪| N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合標簽。
冀百康重組腸激酶凍干粉采用重組畢赤酵母高效分泌表達技術,經層析純化、超濾、冷凍干燥制成的凍干粉。本品氨基酸序列來源于牛腸激酶序列,含有 6 個組氨酸標簽,不含其他蛋白酶。
產品優(yōu)勢:
無動物源性:無動物病毒、無致病物質、無外源因子污染,安全性高。
生產規(guī)模 1000L以上,批間質量穩(wěn)定。
合規(guī)性:生產設備和生產環(huán)境符合相關法規(guī)要求,符合GMP指導原則。
質量文件完整:按客戶需求,可提供相關法規(guī)支持文件。
產品中文名同義詞:腸蛋白酶、腸胨酶、腸激活酶、腸肽酶
本品僅供研究使用,不得用于動物或人類的診斷或治療。
[運輸及儲存穩(wěn)定性]
運輸穩(wěn)定性:冰袋運輸,活性穩(wěn)定。
儲存穩(wěn)定性:-15℃及以下,24 個月穩(wěn)定,25℃,一周內無活.性損失。緩沖體系:50mM Tris-HCl,pH8.0,250mM NaCl,2mMCa2+,50%甘油。
凍融穩(wěn)定性:反復凍融 5 次,無活性損失。
【推薦使用方法】
25℃酶切條件為:25mM Tris-HCl pH8.0 體系中融合蛋白 0.1-1mg/ml(蛋白總量 50-100μg),重組 EK 0.1~2U,酶切 16~24 小時,用 SDS-PAGE 檢測酶切效果。
4℃酶切條件為:可在 4℃對底物進行有效低溫酶切,但需要將酶切時間延長至 48~64 小時,或增加 2-3 倍酶量。低溫酶切有時候可獲得比 25℃更好的酶切效果。
在>200mM 咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切效果會受影響??蓞⒄找韵峦扑]方法進行酶切:
1) 為獲得理想酶切結果,請將樣品透析到 25mM Tris-HCl pH 8.0 緩沖液中,再進行酶切;
2) 若不便透析,可將樣品稀釋,咪唑含量在 100mM 以下,NaCl 濃度在 50mM 以下,甘油濃度 5% 以下進行酶切,酶的用量與蛋白的比例不變(即 1U 酶切 500μg 蛋白);
3) 如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種,且不便去除,此時適當增加酶量或延長酶切時間,也可 達到較好酶切效果。
可對酶切條件進行優(yōu)化,例如緩沖液 pH,融合蛋白濃度,EK 的量,以及酶切時間,融合蛋白能在穩(wěn)定條 件下被酶切,用 SDS-PAGE 檢測酶切效果。
去除重組腸激酶的辦法:可使用胰蛋白酶抑制劑親和層析去除重組腸激酶。
注意:不建議 37℃條件下酶切,可能會有非特異性酶切出現。
持續(xù)更新中......
牛腸激酶
畢赤酵母
類白色粉末
≥1000U/mg pro.
≥20.0%
單一主條帶
35±7 kDa
* 實際參數以產品每批次COA為準;