酶 (enzyme),是由活細(xì)胞合成、在機(jī)體內(nèi)行使催化功能的生物催化劑。目前已發(fā)現(xiàn)的酶約有萬余種。日常實(shí)驗(yàn)中,在貼壁細(xì)胞傳代前需要把細(xì)胞用消化試劑從培養(yǎng)容器表面解離出來,細(xì)胞得以分離成單個懸液傳代至含新鮮培養(yǎng)基的新容器內(nèi)。細(xì)胞消化的好,后續(xù)實(shí)驗(yàn)就會進(jìn)行的更加順利;反之,則既浪費(fèi)了時間又出不了成果。在細(xì)胞消化的方法中,酶消化法是最常用的方法,使用合適的消化酶則是細(xì)胞消化的關(guān)鍵步驟,我們整理了一份細(xì)胞消化類產(chǎn)品選擇指南,方便您更好的選擇適合自己實(shí)驗(yàn)的產(chǎn)品。
常見用于細(xì)胞消化和酶切的類別
重組胰蛋白酶
重組胰蛋白酶是一種使用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的酶?,F(xiàn)代生物制藥的生產(chǎn)過程中,使用含有動物源的原料,可能會將引起人畜共患病的潛在病毒源帶入產(chǎn)品中,如瘋牛病的BSE、口蹄疫病毒等,為了減少污染源,通過基因工程技術(shù)合成胰蛋白酶,解決了傳統(tǒng)使用的豬或牛胰蛋白酶可能帶來病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)。重組胰蛋白酶多用重組大腸桿菌或酵母系統(tǒng)重組表達(dá)并經(jīng)過多步層析純化獲得,重組胰蛋白酶與天然提取的胰蛋白酶相比具有相同的特性,其氨基酸序列與豬源胰蛋白酶序列同源,能特異性切割多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基。因其無動物源污染性,在醫(yī)藥開發(fā)、生化研究領(lǐng)域中有著廣泛的應(yīng)用。
產(chǎn)品優(yōu)勢
● 不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑制劑;
● 符合中國藥典2020版的標(biāo)準(zhǔn);
● 精細(xì)化的過程控制,成就了重組胰蛋白酶的極高純度;
● 高比例β構(gòu)型,以及超高比活性(≥3800USP units/mg pro.);
● 重組胰蛋白酶凍干粉在40℃可存放10天以上;
● 在2~8℃時可存放6個月以上,-15~-20℃時可存放24個月;
重組賴氨酰內(nèi)切酶
(雙專利加持原料)
重組賴氨酰內(nèi)切酶屬于生物化學(xué)級別的基因工程酶,不含有其他雜蛋白酶(如Lys-N、Arg-C等絲氨酸類蛋白酶),不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑制劑。選用Achromobacter lyticus基因,克服大腸桿菌表達(dá)難題,選育高活性菌株,經(jīng)高密度發(fā)酵、分離純化和冷凍干燥而制成的凍干粉,可特異性切割賴氨酸殘基羧基端的肽鍵,具有天然賴氨酰內(nèi)切酶相同的特異性和活力,且分為生化級和質(zhì)譜級兩種。
產(chǎn)品優(yōu)勢
● 純化全過程在溫和環(huán)境中完成,防止酶活損失;
● SDS-PAGE電泳,單一主條帶;
● 酶的比活性≥3.0AU/mg pro.;
● 酶切效率高,2AU酶即可完全酶切1g大多數(shù)融合蛋白;
其他工具酶
重組腸激酶(Enterokinase, light chain)是一種高度專一性識別Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白酶,在Lys的C端水解多肽,具有高度專一性,水解效率高的特點(diǎn),其活性可達(dá)11.5U /μl 。
重組Kex2蛋白酶屬于(E.C.3.4.21.61)屬于枯草桿菌蛋白酶家族,為酵母自身編碼的一種前體加工酶,Ca2+ 依賴型絲氨酸蛋白酶,能夠?qū)R恍缘刈R別和切割 Lys-Arg,Arg-Arg,Pro-Arg 等雙堿性氨基酸的羧基端肽鍵,不同于Trypsin,該酶不能識別和切割單一堿性氨基酸即 Arg或 Lys 的羧基端肽鍵。
二者皆采用重組畢赤酵母高效達(dá)技術(shù),分離純化得到,是具有高純度、高活性特點(diǎn)。
產(chǎn)品優(yōu)勢
● 快速有效且溫和的細(xì)胞消化酶,對細(xì)胞損傷小,且能維持細(xì)胞膜完整性;
● 來源于酵母表達(dá),無支原體或其他動物病毒污染;
● 穩(wěn)定性強(qiáng),不受溫度、pH及血清組分的影響;
● 可用于多種類型組織和細(xì)胞的分離等。
使用說明
*注:兩個貨號代表不同級別,具體請聯(lián)系業(yè)務(wù)人員。
產(chǎn)品列表
*具體參數(shù)以每批次COA文件為準(zhǔn)